Essai de phase randomisé et contrôlé par placebo d’un probiotique de Lactobacillus crispatus administré par voie intravaginale pour la prévention d’une infection récurrente des voies urinaires

Contexte Infections des voies urinaires Les infections urinaires sont fréquentes chez les femmes et récidivent fréquemment L’épuisement des lactobacilles vaginaux est associé au risque d’infection urinaire, ce qui suggère que la réplétion peut être bénéfique. Nous avons mené un essai contrôlé par placebo en double aveugle d’un suppositoire intraveineux Lactobacillus crispatus probiotique Lactin-V; Osel pour la prévention des infections urinaires récurrentes chez les femmes préménopausées Méthodes Cent jeunes femmes ayant des antécédents d’IU récurrentes ont reçu des antimicrobiens pour infection urinaire aiguë, puis ont été randomisés pour recevoir Lactin-V ou un placebo quotidiennement pendant des jours, puis une fois par semaine pendant des semaines. semaine et semaines après l’intervention et pour les infections urinaires; Des échantillons d’urine pour la culture et des prélèvements vaginaux pour la réaction en chaîne de polymérase de l’ARN ribosomique S en temps réel ont été collectés. Résultats Des infections récidivantes sont survenues chez /% des femmes recevant Lactin-V par rapport à /% des femmes recevant un risque relatif [RR], ; % d’intervalle de confiance, – Une colonisation vaginale de haut niveau avec L crispatus ≥ S des copies de gène d’ARN par écouvillon tout au long du suivi a été associée à une réduction significative des infections urinaires récidivantes seulement pour Lactin-V RR pour Lactin-V, RR pour le placebo,; P & lt; Conclusions Lactin-V après le traitement de la cystite est associée à une réduction des infections urinaires récurrentes Des essais d’efficacité plus importants de cette nouvelle méthode de prévention des infections urinaires récidivantes sont justifiésNotical Trials Registration NCT

Infection des voies urinaires L’infection urinaire est extrêmement courante chez les jeunes femmes en bonne santé et entraîne des coûts considérables de morbidité et de soins de santé Une enquête récente auprès des femmes aux États-Unis a révélé que le risque d’infection urinaire était de & gt;% Environ% des femmes développent des épisodes récurrents fréquents, qui nécessitent souvent des traitements répétés aux antimicrobiens Augmentation de la résistance aux antimicrobiens couramment utilisés tels que le triméthoprime-sulfaméthoxazole et les fluoroquinolones, même chez les uropathogènes responsables Les infections urinaires acquises rendent le traitement et la prévention de ces infections plus problématiques Ainsi, de nouvelles stratégies de prévention et de traitement non antimicrobien sont nécessaires.Une approche de traitement non antimicrobien complémentaire pour laquelle il existe de fortes preuves mécanistes est l’utilisation d’un peroxyde d’hydrogène. produisant HO lactobacillus probiotique pour restaurer la microbiote vaginale normale chez les femmes qui sont sujettes aux infections urinaires Nous et d’autres avons démontré que les femmes ayant des infections urinaires récidivantes présentaient souvent des altérations spécifiques de leur microbiote vaginale, en particulier au moment de l’infection urinaire, soit des taux accrus de colonisation par Escherichia coli et appauvrissement des lactobacilles HO normalement prédominants Si la réplétion des lactobacilles HO normaux était efficace pour réduire la colonisation et l’infection urinaire par E. coli, cette stratégie réduirait les coûts et la morbidité associés aux infections urinaires, y compris le temps perdu au travail, les soins de santé, les antimicrobiens. Peu d’études cliniques randomisées, à double insu et contrôlées contre placebo, portant sur une taille d’échantillon adéquate avec une souche probiotique physiologiquement pertinente, ont été menées à l’appui de cette approche. nécessaire pour vérifier si cette approche est de valeurLactine-V Osel contient un HOLactobacillus cris soigneusement sélectionné patus strain CTV – isolé à partir du vagin d’une femme en bonne santé et a été développé comme un probiotique vaginal pour une utilisation dans des états pathophysiologiques caractérisés par des altérations de la flore vaginale, comme la vaginose bactérienne , rUTI, et potentiellement d’autres. un essai de phase randomisé, en double aveugle, sur l’innocuité et la tolérance de Lactin-V chez les femmes avec rUTI, montrant que L crispatus CTV- peut être administré sous forme de suppositoire vaginal avec un minimum d’effets indésirables chez les femmes en bonne santé ayant des antécédents de TIU Par la suite, nous avons mené un essai randomisé, en double aveugle, contrôlé par placebo sur la Lactine-V chez des femmes atteintes d’IUTI. Les principaux objectifs de l’étude étaient d’évaluer la capacité du probiotique à réduire l’incidence de la rUTI. colonisation vaginale, pour évaluer les effets sur le microbiote vaginal des femmes après le traitement de l’infection urinaire, et de confirmer la sécurité du probiotique Nous avons constaté que la lactine-V réduit le risque de rUTI environ La lactase-V est un candidat prometteur pour la prévention de l’IUTI, mais elle a été bien tolérée par la prophylaxie antimicrobienne, a permis une colonisation vaginale de haut niveau chez la plupart des femmes.

Méthodes

Participants

Nous avons recruté des femmes préménopausées âgées de – ans avec cystite courante, symptomatique, non compliquée du centre de santé étudiant à l’Université de Washington Seattle de Février à Février Cystite à l’enrôlement et au cours du suivi a été défini comme symptômes typiques de l’IU dysurie, fréquence, ou Urgences et nombre de cellules pyurie, ≥ leucocytes par champ de forte puissance sur analyse urinaire et une culture urinaire positive évacuée, définie comme ≥ unités formant colonie UFC / ml de ou plus d’uropathogènes E coli ou autres Enterobacteriaciae, espèces d’Enterococcus, ou groupe Les streptocoques B ou ≥ UFC / mL d’espèces de Lactobacillus présents en tant qu’organisme infectant unique Les participants admissibles avaient des antécédents d’infection urinaire symptomatique au moins traitée au cours des derniers mois avant les exigences actuelles d’admissibilité. l’année dernière ou lors de la visite à la clinique de dépistage; ne pas être enceinte et avoir des cycles menstruels réguliers ou une aménorrhée pendant au moins des mois suite à l’utilisation d’un contraceptif hormonal ou d’une hystérectomie; l’accord de ne pas utiliser d’autres produits intravaginaux, l’automédication pour les infections urinaires ou la prophylaxie antimicrobienne lors de l’utilisation du produit; accord de ne pas utiliser de tampons pendant des heures après l’insertion du produit; accord pour utiliser le contrôle des naissances et, si des préservatifs sont utilisés, utiliser des préservatifs non permissifs fournis par le personnel du site d’étude; et la capacité de comprendre l’anglais et de fournir un consentement éclairé. Les critères d’exclusion étaient les suivants: cystite compliquée actuelle ou pyélonéphrite non compliquée; un antécédent d’anomalie urologique ou de calculs rénaux; infection sexuellement transmissible récente STI ou BV ou un antécédent de BV récurrente; les facteurs de risque d’IST et d’infection par le virus de l’immunodéficience humaine (VIH); grossesse ou dans les mois de la grossesse; lactation; ménopause; le diabète, l’infection par le VIH ou tout autre état immunodéprimé; l’abus de drogues ou d’alcool; résultats anormaux de l’examen pelvien; et symptômes persistants et / ou pyurie après le traitement de l’inscription aiguë UTI

Randomisation

Les participants à l’étude ont été assignés au hasard à la Lactine-V ou au placebo en utilisant un système de numérotation aléatoire généré par ordinateur dans des assignations bloquées pour atteindre des tailles d’échantillon égales dans les deux groupes. La substance d’intervention assignée Lactin-V ou placebo était conditionnée en paquets identiques. attribution et numéro de l’étude séquentielle La liste n’était pas disponible pour consultation par les cliniciens qui ont vu les participants à l’étude ou par le personnel de laboratoire qui manipulait leurs spécimens.

Étudier le design

Les participants ont été traités pour une infection urinaire aiguë à la visite avec un traitement standard. À la visite, prévue pendant les jours suivant le traitement par UTI, les participants ont été randomisés pour recevoir des capsules de gélatine Lactin-V sans applicateur; Les participants puis les suppositoires vaginaux auto-administrés une fois par semaine pendant des semaines Les participants ont été vus lors des visites de suivi prévues à la semaine de la visite et des semaines de visite après le début de Lactin-V ou un placebo et pour les infections urinaires symptomatiques Lors du suivi de routine ou des visites symptomatiques, les participants ont subi une entrevue structurée, y compris un examen des effets indésirables, et un examen physique structuré qui comprenait les éléments suivants: évaluation de l’apparence des organes génitaux externes; examen au spéculum du vagin et du col de l’utérus; examen bimanuel; montage vaginal humide et évaluation plus poussée du test de pH de la décharge vaginale, test de reniflement, et examen microscopique des cellules indicatrices, de la levure et des trichomonas; jauge d’urine pour l’esterase leucocytaire, le nitrite et le sang; et le dénombrement des globules blancs de l’urine à l’aide d’un hémocytomètre Des échantillons ont été prélevés pour l’analyse urinaire, l’urine et la culture vaginale Des prélèvements vaginaux sur écouvillon pour l’ARN ribosomal S en temps réel ARN polymérase qRPC pour L crispatus pour évaluer la colonisation vaginale ont été collectés décrit ailleurs , en utilisant des écouvillons en mousse de polyuréthane Epicentre Biotechnologies brossé contre la paroi vaginale latérale, resheathed et congelé immédiatement à – ° C puis maintenu à – ° C jusqu’à l’analyse Si les participants ont développé des symptômes de la cystite aiguë au cours de l’étude, Si l’épisode a eu lieu pendant l’ouverture de la clinique, les participants sont entrés dans la clinique, ont été évalués pour les paramètres cliniques et ont fourni des échantillons pour les tests décrits ci-dessus. Si l’épisode s’est produit pendant la fermeture de la clinique, les participants ont été invités à prélever un spécimen pour urin La culture, la réfrigérer et l’apporter à la clinique dès l’ouverture de la clinique Les participants ayant développé une infection urinaire symptomatique pendant le suivi de l’étude ont été traités et poursuivis dans le cadre de l’étude.

Procédures de laboratoire

Les procédures de laboratoire ont été effectuées sur des échantillons cliniques en utilisant des méthodes standard, décrites ailleurs , comprenant des bandelettes urinaires, des analyses d’urine et des cultures vaginales et urinaires de bactéries facultatives et de Lactobacillus. Nous avons quantifié L crispatus dans des prélèvements vaginaux prélevés et conservés au chaque visite, l’extraction de l’ADN et la réalisation de qPCR du gène S rRNA en temps réel avec un test spécifique de L crispatus, comme décrit ailleurs

L Niveaux de colonisation de Crispatus et modèles

Sur la base des résultats de qPCR, la colonisation de L crispatus a été analysée en comparant le niveau de colonisation de L crispatus à la fin de l’étude dans les groupes de participants, ainsi que les modèles de colonisation au cours de l’étude chez chaque participant https://www.nizagara.net. la colonisation de niveau L crispatus a été définie comme ayant des copies de gène d’ARN ≥ S de L crispatus par écouvillon, tandis que la colonisation de bas niveau a été définie comme ayant & lt; Un schéma de colonisation de haut niveau a été défini chez chaque participant comme démontrant une colonisation de haut niveau de L crispatus lors de la première visite de suivi et le maintien de ce niveau tout au long de la visite de suivi et de toute visite symptomatique Pendant le suivi Un modèle de colonisation de bas niveau a été défini comme tous les autres modèles ne répondant pas à ces critères.

Taille de l’échantillon, objectifs et approbation du conseil d’examen institutionnel

La taille de l’échantillon cible et l’inscription finale étaient des participants, dans chaque groupe, pour fournir des informations sur l’activité biologique de l’intervention Lactin-V et ses effets sur l’incidence de l’IUTR chez les femmes à haut risque. L’objectif principal était d’évaluer la lactine-V chez les femmes préménopausées en bonne santé avec rUTI pour la capacité du probiotique à réduire l’incidence de la cystite et de produire une colonisation vaginale de haut niveau avec L crispatus à la fin des semaines. avec L crispatus dans le microbiote vaginal et de confirmer la sécurité du probiotique L’étude a été approuvée par le comité d’examen institutionnel de l’Université de Washington et enregistré comme un essai clinique Clinicaltrialsgov ID non NCT

L’analyse des données

Toutes les femmes enrôlées et randomisées ont été décrites en utilisant les moyennes, les médianes et les comptes de fréquence. L’effet de l’intervention a été décrit en utilisant les risques relatifs RR et les intervalles de confiance% ICs Des analyses per protocole ont été effectuées et ont produit des résultats similaires

RÉSULTATS

Inscription et démographie

L’inscription totale était des participants; L’âge médian des participants était de deux ans dans les deux groupes Le nombre médian d’IU à vie était de trois quarts des femmes dans les deux groupes n’avaient jamais été mariés, et% étaient sexuellement actifs avec un taux médian égal de l’activité sexuelle au cours du mois précédant l’inscription; <% des femmes avaient utilisé une méthode contraceptive contenant des spermicides au cours du dernier mois

Tableau Caractéristiques de base des participants à l’étude Caractéristiques Participants recevant Lactin-V n = Participants recevant un placebo n = Tous les participantsn = Âge en années, gamme médiane – – – Jamais marié Race ou ethnie Blanc Asiatique Afro-Américain Amérindien Autre Hispanique Non d’IUs dans la vie, Gamme médiane – – – – ≥ Activité sexuelle au cours du dernier mois Épisodes de rapports sexuels au cours du dernier mois, médiane Tous les spermicides utilisés au cours du dernier mois Résultat du test Papanicolaou anormal Caractéristiques Participants recevant Lactin-V n = Participants recevant un placebo n = Tous les participantsn = Âge en années, intervalle médian – – – Jamais marié Race ou ethnie Blanc Asiatique Afro-Américain Amérindien Autre Hispanique Non des infections urinaires dans la vie, gamme médiane – – – – ≥ Activité sexuelle au cours du dernier mois Épisodes de rapports sexuels au cours du mois passé, médiane N’importe quel spermicide utilisé au cours du mois précédent Résultat du test Papanicolaou non% des participants, sauf indication contraire UTI, infection des voies urinairesaDiaphragme ou utilisation du préservatif spermicideVoir Grand

Figure Vue largeTélécharger la diapositive Randomisation et suivi des participants L crispatus CTV-, souche de Lactobacillus crispatus CTV-Figure Voir grandDownload slideRandomisation et suivi des participants L crispatus CTV-, souche de Lactobacillus crispatus CTV-

Résultats cliniques et effet probiotique sur le microbiote vaginal

Sept pour cent des femmes recevant Lactin-V avaient au moins UTI par rapport à% des femmes recevant un placebo RR; % IC, – Tableau La prévalence des EI coli était similaire dans la prévalence des groupes dans le groupe Lactin-V,%; prévalence dans le groupe placebo,% Sur la base de l’analyse qPCR, la plupart des femmes recevant Lactin-V ont atteint une colonisation vaginale de haut niveau ≥ avec L crispatus ≥ S copies de gène d’ARN par écouvillon Lors de la visite finale à semaines, la prévalence de La colonisation de L crispatus chez les receveurs de Lactine-V était de% de participants, comparé à% de receveurs de placebo P =

Tableau Taux d’infection des voies urinaires par intervention et Lactobacillus crispatus Modèle de colonisation Intervention Non% des participants développant une infection urinaire récidivante Risque relatif% CI Lactine-V n = – Placebo n = … Intervention, L crispatus modèle de colonisation Lactine-V, niveau élevé n = – Lactine -V, niveau bas n = … Placebo, niveau élevé n = – Placebo, niveau bas n = … Intervention Non% de participants développant une infection urinaire récidivante Risque relatif% CI Lactine-V n = – Placebo n = … Intervention, L crispatus Lactine-V, niveau élevé n = – Lactine-V, niveau bas n = … Placebo, niveau élevé n = – Placebo, niveau bas n = … NOTE CI, intervalle de confiance; Lactine-V, L crispatus suppositoire intravaginal probiotique Osel; Infection des voies urinairesUne infection de l’appareil urinaire chez les grandes femmes ayant reçu Lactin-V et atteint un schéma de colonisation vaginale L crispatus de haut niveau tout au long de l’étude avait une réduction significative du risque d’IUTR, alors que ce type de colonisation reçu un placebo, ce n’était pas un RR protecteur pour la lactine-V; RR pour le placebo,; P & lt; Tableau Il n’y avait pas de différence significative dans les organismes causatifs pour les événements rUTI dans les bras de l’étude

Sécurité et Tolérabilité

Nous avons confirmé les résultats de l’étude de phase concernant l’innocuité et la tolérance de Lactin-V Des effets indésirables ont été rapportés par% de participants ayant reçu Lactin-V et par% de participants ayant reçu un placebo; les effets indésirables les plus fréquents comprenaient des pertes vaginales ou des démangeaisons ou une gêne abdominale modérée Un participant du groupe placebo a arrêté le traitement en raison d’effets indésirables L’incidence de BV ou vaginite candidose était faible dans les deux groupes de traitement% -% et contrairement aux résultats de la phase étude , il n’y avait pas de différence significative dans les taux de pyurie entre le taux de groupe à la visite chez les femmes dans le groupe Lactin-V,%; taux à la visite chez les femmes du groupe placebo,%; taux de visite chez les femmes du groupe Lactin-V,%; taux à la visite chez les femmes du groupe placebo,% Aucun épisode de pyélonéphrite n’a été rapporté dans les deux groupes

DISCUSSION

Ainsi, l’utilisation d’une méthode qPCR pour évaluer la colonisation de L crispatus chez les femmes dans les deux bras de l’étude nous a permis de distinguer le rétablissement naturel de la microbiote vaginale après une infection urinaire, comme cela a pu potentiellement se produire chez les participants recevant le placebo, d’effets spécifiques attribuables à l’intervention avec le probiotique Lactin-V. Cette analyse a révélé une conclusion très frappante, à savoir que les femmes recevant le placebo L crispatus au cours du suivi, cette colonisation ne les a pas protégés contre le RR; % IC, -, alors que les femmes qui ont reçu la lactine-V et ont obtenu une forte colonisation ont été protégées contre le rUTI RR; % CI, -; P & lt; Ainsi, puisque les femmes dans les deux bras de l’étude avaient une réduction de la colonisation des lactobacilles après une infection urinaire non démontrée, recevoir Lactin-V après traitement pour une infection aiguë provoque un avantage significatif sur la repopulation du microbiote vaginal avec L crispatus endogène. Ceci est confirmé par des études in vitro montrant que la souche probiotique adhère aux cellules VEC des cellules épithéliales vaginales en grand nombre, en particulier les cellules des femmes atteintes de TIU. En outre, L crispatus CTV- Stapleton, des données non publiées, des données non publiées Les études en cours dans notre groupe visent à comprendre les mécanismes de protection in vivo et à optimiser ce régime prophylactique dans une revue récente de contrôle contrôlé randomisé. essais randomisés randomisés de lactobacillus probiotic Seuls les ECR pour la prévention des infections urinaires ont été identifiés, et seuls ceux-ci ont démontré une réduction significative des taux de récidive La plupart des études n’ont pas évalué la colonisation vaginale avec lactobacilles après traitement, y compris l’étude positive de la prévention des infections urinaires. Dans notre étude, nous avons trouvé qu’une évaluation quantitative du microbiote vaginal était utile pour déterminer l’efficacité de cette intervention afin de prévenir la comparaison directe de cette intervention avec la prophylaxie antimicrobienne pour rUTI, mais une comparaison de nos résultats avec les témoins historiques est Sen a examiné plusieurs modalités de prévention de l’IUTI, notant que les ECR démontrent l’efficacité des régimes de prophylaxie antimicrobienne continue et post-coïtale. Il y avait plus d’ECR de schémas prophylactiques continus, et les schémas d’administration de ces régimes sont plus semblables à notre étude. ont rapporté que dans une méta-analyse des ECR d’antimicrobiens continus prophylaxie au cours des mois de suivi, les taux de rUTI ont été réduits à% des participants par rapport à% des participants parmi les receveurs du placebo, avec un RR de rUTI qui est très comparable à nos résultats RR; En résumé, le traitement par Lactin-V chez les femmes atteintes d’IUTR entraînait une colonisation robuste et prolongée avec L crispatus, avec une tendance à la réduction de l’incidence d’ITIR de ~%. Les effets protecteurs de la lactine-V étaient encore plus marqués chez ces femmes. qui a atteint la colonisation la plus robuste avec L crispatus et reflète un avantage apparent de traitement pour Lactin-V sur la récupération naturelle du microbiote vaginal après un épisode de rUTI Cette intervention antimicrobienne-épargnant, bien tolérée se compare favorablement aux données historiques concernant la prophylaxie antimicrobienne, la Les résultats de notre étude confirment la nécessité d’un essai randomisé, à double insu et contrôlé contre placebo, plus vaste, pour confirmer l’efficacité de Lactin-V dans la prévention de l’IUTR dans la population générale des femmes à risque. L’étude de cette intervention dans une cohorte basée sur la population peut également fournir des informations utiles sur les sous-groupes cibles de femmes qui bénéficieraient le plus de ce type d’intervention. Nous sommes grandement redevables à D C Dugdale, directeur médical, et au personnel du Centre de soins de santé primaires Hall Health de l’Université de Washington, Seattle, WA, pour leur aide dans l’inscription aux études; Ellen Cassen et Natalie DeShaw pour leur aide dans l’élaboration de protocoles d’étude, la collecte de données, la coordination de projets et la gestion de données au Hall Health Centre; Cheryl Wobbe, Sheila Manuguid et Amanda White Université de Washington Laboratoire de recherche sur l’infection des voies urinaires pour l’assistance en laboratoire; Peter Lee d’Osel Santa Clara, CA; et les participants à l’étude Nous dédions ce manuscrit à la mémoire de Walter Stamm. Soutien financier Ce travail a été soutenu par l’Institut national du diabète et des maladies digestives et rénales don P DK à WES, AES, M AY, TMH, PLR, CAC, Y YY, et MC; et le Bureau de la recherche sur la santé des femmes, les Instituts nationaux de la santé octroient le SCOR P DK au W ​​E S, A E S, M A-Y, T M H, P L R, C A C, Y Y-Y et M CPotential Conflits d’intérêts Tous les auteurs: pas de conflits |

Pharmacocinétique de la polymyxine B chez un patient atteint d’insuffisance rénale: un rapport de cas