Relations génétiques entre les pathogènes respiratoires isolés de la plaque dentaire et le liquide de lavage broncho-alvéolaire des patients de l’unité de soins intensifs subissant une ventilation mécanique

Contexte Les études récentes suggèrent que les biofilms de plaque dentaire servent de réservoir aux agents pathogènes respiratoires. Le but de cette étude était de déterminer la relation génétique entre les souches respiratoires et les pathologies respiratoires. Les échantillons de la plaque et de la sécrétion trachéale ont été prélevés le jour de l’admission à l’hôpital et tous les deux jours par la suite jusqu’à la sortie de l’unité de soins intensifs de l’unité de soins intensifs de VAPMethods. 100 patients ayant subi une ventilation mécanique Un lavage broncho-alvéolaire a été réalisé chez 30 patients avec suspicion d’électrophorèse sur gel VAP et le typage multilocus a été utilisé pour déterminer la parenté génétique des souches obtenues à partir d’échantillons de lavage oral, trachéal et broncho-alvéolaire. les oléates de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, les espèces Acinetobacter et les espèces entériques récupérées à partir de la plaque de la plupart des patients étaient indiscernables des isolats récupérés du liquide de lavage broncho-alvéolaire, à savoir> 95% de similitude des modèles d’électrophorèse sur gel en champ pulsé. Les souches de Pseudomonas présentaient des profils génétiques identiques entre les patients, ce qui suggérait une source d’infection environnementale commune. Conclusions Les pathogènes respiratoires isolés du poumon sont souvent génétiquement indiscernables des souches de la même espèce isolées de la cavité buccale chez les patients recevant une ventilation mécanique admis à l’hôpital. De la communauté Ainsi, la plaque dentaire sert de réservoir important pour les agents pathogènes respiratoires chez les patients qui subissent une ventilation mécanique. EnregistrementTrial Identifiant ClinicalTrialsgov: NCT00123123

Pneumonie associée à un ventilateur La PAV est une infection importante chez les patients hospitalisés dans des unités de soins intensifs qui reçoivent une ventilation mécanique [1] La PAV survient chez de tels patients 48 h après l’intubation [2] Les agents pathogènes courants incluent le Staphylococcus aureus et les bactéries Gram négatif. Pseudomonas aeruginosa et Enterobacteriaceae [3] Les bactéries à Gram négatif représentent 60% de toutes les pneumonies nosocomiales [4] Le taux de mortalité associé à la PAV peut atteindre 76% [5], en particulier chez les patients atteints d’une maladie potentiellement mortelle La prévalence de la PAV est de 10% -65% chez les patients recevant une ventilation mécanique, avec des taux de mortalité de 24% -76%, selon la méthode d’étude, la population de patients et le mode de traitement [1, 6-8] peut prolonger la durée de la ventilation mécanique de 14 à 32 jours et la durée du séjour aux soins intensifs de 117 jours, entraînant une augmentation des frais hospitaliers totaux de 150 000 $ par patient [9] La plaque dentaire est complexe et dyna biofilm micro qui se forme sur les surfaces dentaires supragingival et sousgingivales, les surfaces de la muqueuse buccale en particulier la langue, et les restaurations dentaires [10] Des études moléculaires récentes ont suggéré que> 700 espèces de bactéries colonisent la plaque dentaire [11] L’hygiène buccale permet une succession microbienne écologique ininterrompue et donc une diversité microbienne accrue dans la plaque dentaire [12, 13] La formation de la plaque est également favorisée par une fonction salivaire réduite, qui est souvent une séquelle de médicaments xérostomiques chez les patients en soins intensifs [14] favorisent la colonisation par les agents pathogènes respiratoires En effet, plusieurs études ont suggéré que la plaque dentaire peut servir de réservoir pour les pathogènes respiratoires chez les patients en réanimation, mais pas chez les sujets communautaires [15-19] Dans la présente étude, une analyse épidémiologique moléculaire était utilisé pour déterminer la relation génétique entre les souches de pathogènes respiratoires isolées de la cavité buccale de patients en L’unité de soins intensifs qui a subi une ventilation mécanique et des souches isolées des sécrétions trachéales et du liquide de lavage broncho-alvéolaire LBA provenant du même patient

Patients, matériaux et méthodes

Population étudiée Les sujets de cette étude prospective ont été recrutés pour un essai clinique randomisé qui a testé l’effet du rinçage oral au gluconate de chlorhexidine sur la colonisation orale par des pathogènes respiratoires Identifiant ClinicalTrialsgov: NCT00123123 L’Université de Buffalo a soumis le protocole d’étude au protocole d’étude. Parmi les patients admis à l’ICTU TICU du Centre médical du comté d’Erie du 14 février 2005 au 15 mai 2006 Tous les participants ou leur substitut ont donné leur consentement éclairé. Les patients présentant les affections suivantes ont été exclus: 1 témoin d’aspiration d’aliments inhalés ou d’autres corps étrangers; 2 pneumonie post-obstructive; 3 traitement à court terme pour une surdose de drogue; 4 traitement de la pneumonie acquise dans la communauté; 5 anomalie de la coagulation du sang diagnostiquée; 6 âge & lt; 18 ans; 7 grossesse; et 8 admission d’une autre USI ou réadmission à la TICUPneumonie a été diagnostiquée en utilisant le système de score d’infection pulmonaire clinique, comme suit: 1 température corporelle notée 0 365 ° C-384 ° C, 1 385 ° C-39 ° C, ou 2 & lt; 360 ° C ou> 390 ° C; 2 leucocytose notée 0 4000-11 000 cellules / ml, 1 11 000-17 000 cellules / ml, ou 2> 17 000 cellules / ml; 3 nouveaux infiltrats radiographiques marqués comme 0 aucun, 1 éparpillé, ou 2 localisés; 4 sécrétions marquées comme 0 aucune à minime, 1 modérée, ou 2 grande quantité; et 5 PaO> 2 / FiO> 2 notés 0 ⩾330 mm Hg ou 2 <330 mm Hg Si le score d'infection pulmonaire clinique était ⩾6, le liquide BAL a été recueilli comme décrit ci-dessous. La confirmation de pneumonie a été définie comme la détection de ⩾104 Les unités formant des colonies bactériennes / mL d'un pathogène respiratoire potentiel dans un spécimen BAL Le score de physiologie aiguë et d'évaluation de santé chronique II a été réalisé comme décrit ailleurs [20] Examen oral Un examen oral a été effectué et des échantillons de plaque dentaire ont été prélevés le jour de l'admission au TICU et toutes les 48 heures par la suite jusqu'à 21 jours ou jusqu'à ce que le patient soit sorti de l'unité; l'examen a été effectué avec un miroir dentaire standard et un éclairage dentaire portatif Le nombre de dents a été énuméré tableau 1 L'indice de plaque a été réalisé pour 6 dents, comme suit: première molaire supérieure droite, incisive centrale supérieure droite, première bicuspide supérieure gauche, inférieure gauche première molaire, incisive centrale inférieure gauche et première prémolaire inférieure droite Si une dent d'index manquait ou si des obstructions empêchaient l'examen de dents spécifiques, une dent proche de la dent manquante ou obstruée était notée. Un seul score 0, aucune plaque; 1, plaque vue seulement sur la pointe d'un explorateur passé sur la surface de la dent; 2, plaque évidente à l'œil nu; 3, des dépôts bruts de plaque ont été assignés pour indiquer la surface avec le plus de plaque Un score moyen a été calculé à partir des 6 dents pour chaque sujet à chaque moment

1000 mmol / L de chlorure de sodium, 10 mmol / L Tris, pH 80 et ont été ajustés à une densité optique à 600 nm de 10-12. Deux cents μL de cellules ont été incubés à 37 ° C pendant 2 min puis mélangés avec 200 μL de fondu 16% d’agarose InCert poids-volume FMC dans du tampon phosphate IV équilibré à 60 ° CS aureus a été mis en suspension dans 200 μL d’agarose Feakem Gold fondu 1% poids / volume contenant 2 μL de solution de lysostaphine Sigma 1 mg / mL Le mélange homogénéisé a été placé dans des puits d’un moule à bouchon jetable 100 pl dans chaque puits; Bio-Rad, placé à 10 ° C pendant 10 min pour se solidifier, puis placé dans un tube capuchon blindé Bio-Rad contenant 5 mL de tampon frais de lyse érythrocytaire 6 mmol / L de chlorhydrate de Tris, pH 80, 1 mol / L de sodium chlorure, 100 mmol / L d’EDTA, pH 80, 05% de Brij-58, 02% de désoxycholate de sodium, 05% de lauroylsarcosine sodique, ribonucléase A [3 ul; Sigma] et lysozyme de Readi-Lyse 2 μL; Epicentre Le tampon a été retiré et remplacé par 2 ml de solution d’ESP 500 mmol / L EDTA, pH 90, 1% lauroylsarcosine sodique, 05 mg / ml de protéinase K Les bouchons ont été incubés avec agitation à 55 ° C pendant 2 h et l’ESP solution a été décantée L’étape de lyse ESP a été omise pour S aureus Les bouchons ont été lavés dans du tampon TE 10 mmol / L de chlorhydrate de Tris, 10 mmol / L EDTA, pH 80 pendant 15 min à 50 ° C 3 fois et ont ensuite été conservés à 4 ° C Jusqu’à digestion par enzyme de restriction in-plug, 1 bouchon a été placé dans un tube de microcentrifugation stérile avec 500 μL de tampon d’enzyme de restriction 445 μL d’eau distillée stérile, 50 μL du tampon 10 × NE approprié [New England BioLabs] et 5 μL Après l’aspiration du tampon de l’enzyme de restriction, 196 μL de tampon d’enzyme de restriction frais ont été ajoutés à 4 μL d’enzyme de restriction à 37 ° C pendant 2-4 h, comme recommandé par le fabricant de sérum albumine bovine New England BioLabs pendant 30 min à température ambiante. S aureus, SmaI; P aeruginosa, NheI ou Spel; Acinetobacter baumannii, ApaI; E. coli et d’autres bacilles à Gram négatif, les gels XbaIPFGE ont été traités comme décrit ailleurs [8, 24-27] en utilisant un appareil de champ électrique homogène à serrage de contour CHEF DR-II; Bio-Rad, les gels ont été colorés avec du bromure d’éthidium et ont été photographiés en utilisant AlphaEase FC et Alpha-Imager Alpha Innotech Pour tous les gels, l’échelle d’ADN λ Bio-Rad a été utilisée comme marqueurs de taille moléculaire.Les images gel gel ont été analysées avec le logiciel BioNumerics Applied Maths normalisées à la souche standard mondiale appropriée S aureus NCTC 8325, P aeruginosa PAO1, ou E coli K12 S aureus ont également été comparées avec le même standard interne fourni par le Dr Fred McDougal Centers for Disease Control and Prevention; Les similitudes en pourcentage ont été calculées par les coefficients de Dice, et les arbres phylogénétiques ont été construits en utilisant la méthode de regroupement des moyennes arithmétiques moyennes des groupes non appariés, 125; optimisation, 05% Une valeur seuil de 90% de similarité a été appliquée pour définir le type de PFGE et pour le séquençage multilocus supplémentaire. Interprétation de la parenté des profils de bande PFGE sur la base des critères de consensus récents [28] a été réalisée comme décrit ailleurs [29] Seuls les types de PFGE étroitement apparentés présentant des différences de 2 ou 3 bandes ou des types PFGE indiscernables comme contrôles positifs ont été choisis pour la caractérisation MLST Des fragments internes de 7 gènes de ménage 400-500 paires de bases de longueur ont été séquencés Les allèles suivants ont été étudiés: arcC, aroE, glpF, gmk, pta, tpi et yqiL pour S aureus; acsA, aroE, guaA, mutL, nuoD, ppsA et trpE pour P aeruginosa; et adk, fumC, gyrB, icd, mdh, purA, et recA pour les noms d’allèles MLST et les types de séquences E coli ont été obtenus à partir du site Web MLST Chaque séquence différente a été assignée comme un allèle distinct Le type de séquence ou le profil allélique pour chaque isolat était déterminé sur la base de la combinaison de 7 allèlesLe protocole PCR et la séquence d’amorce pour les 7 locus MLST ont été obtenus à partir du site Web MLST [30] Toutes les séquences alléliques MLST utilisées pour le séquençage ont été enveloppées par 1 chevauchement avant et 1 chevauchement inverse, lecture de séquence de haute qualité score de qualité minimum de 35 Lectures directe et inverse pour les 7 loci MLST de chaque isolat ont été assemblées à partir des paires lues avec l’utilisation du logiciel TIGR Assembler modifié J Craig Venter Institute La séquence assemblée était orientée dans le 5 ‘→ 3 ‘Direction avec la séquence flanquante enlevée Les chromatogrammes de séquence pour les allèles uniques ont été déposés dans la base de données MLST [30] Méthicilline resistancemecAand Panton-Valentine Leukocidin PVL Typing Multiplex La PCR pour le typage mecA et PVL a été réalisée comme décrit par McClure et al [32], avec une modification de l’amorce Luk-PV-2 5’-GCATCAASTGT-ATTGGATAGCAAA-AGC-3 ‘, qui a été substituée pour tenir compte du mononucléotide polymorphismes aux 8 nucléotides

Résultats

Caractéristiques cliniques des patients atteints de PVA Cent patients ayant bénéficié d’une ventilation mécanique ont été inclus dans l’étude. Les pathogènes respiratoires cibles ont été récupérés dans les cavités buccales de 60 à 60% des 100 patients et les spécimens BAL ont provoqué des pathogènes respiratoires chez 30% des 60 patients. Ces 30 patients, 18 60% ont été sélectionnés pour une analyse moléculaire supplémentaire car ils ont été colonisés par le pathogène cible ⩾1 dans les 3 sites d’échantillonnage: bouche, trachée et poumon. Les caractéristiques cliniques de ces patients et les pathogènes isolés correspondants sont résumés dans le tableau 1 Trois patients patients 12, 21 et 48 hébergeaient 2 espèces pathogènes dans chacun des 3 sites et 1 patient patient 59 hébergeaient 3 espèces présentes dans tous les 3 sitesAnalyse PFGE des isolats Un total de 83 profils de bandes PFGE ont été obtenus à partir de 26 isolats de S aureus figure 1, 21 isolats de P aeruginosa figure 2, 12 isolats de E coli figure 3, et 24 isolats d’autres bacilles gram négatif figure 4 Avec un seul ex Dans ce cas, la comparaison des souches de la même espèce obtenues à partir de différents sites chez un même patient n’a montré aucune différence dans le patron PFGE, c.-à-d. indice de similitude de 90% L’exception concernait 1 patient patient 94 qui hébergeait 2 clones de S aureus

Une échelle d’indice de similarité génétique est indiquée au-dessus du dendrogramme Identification du patient Pt ID, site de l’échantillon Source, nombre de jours après l’admission à l’unité de soins intensifs que la souche a été isolée Jour, et séquence multilocus type ST sont fournis USA100, USA200, USA400, USA800, et NCTC 8325 souches des Centers for Disease Control et de prévention ont été utilisés comme souches de référence * Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline Pour les conditions de génotypage, voir les patients, les matériaux et les méthodes BAL, lavage bronchoalvéolaire ; SG, plaque dentaire supragingivale; TS, sécrétion trachéaleFigure 1Vue plus largeTélécharger les patronsPDF avec dendrogramme des isolats de Staphylococcus aureus Une échelle d’indice de similarité génétique est affichée au dessus du dendrogramme Identification du patient Pt ID, site d’échantillonnage Source, nombre de jours après l’admission à l’unité de soins intensifs Les souches USA100, USA200, USA400, USA800 et NCTC 8325 des centres de contrôle et de prévention des maladies ont été utilisées comme souches de référence. Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline Pour les conditions de génotypage, voir Patients, matériaux et méthodes BAL , lavage broncho-alvéolaire; SG, plaque dentaire supragingivale; TS, sécrétion trachéale

Une échelle d’indice de similarité génétique est montrée au-dessus du dendrogramme Identification du patient Pt ID, site de l’échantillon Source, nombre de jours après l’admission à l’unité de soins intensifs que la souche a été isolée Jour, et séquence multilocus type ST sont fournis La souche P aeruginosa PAO1 a été utilisée comme souche de référence Pour obtenir des profils de bande PFGE optimaux, différentes conditions de temps d’impulsion et d’heures de fonctionnement ont été utilisées Pour les conditions de fonctionnement, voir BAL, lavage broncho-alvéolaire; SG, plaque dentaire supragingivale; TS, sécrétion trachéaleFigure 2Vue plus largeTéléchargementPDF avec dendrogramme des isolats de Pseudomonas aeruginosa Une échelle d’indice de similarité génétique est affichée au-dessus du dendrogramme Identification du patient Pt ID, site d’échantillonnage Source, nombre de jours après l’admission à l’unité de soins intensifs Pour obtenir des profils de bande PFGE optimaux, différentes conditions de temps d’impulsion et d’heures de fonctionnement ont été utilisées. Pour les conditions de fonctionnement, voir Patients, matériaux et méthodes BAL, lavage broncho-alvéolaire; SG, plaque dentaire supragingivale; TS, sécrétion trachéale

Une grande échelle de l’indice de similarité génétique est indiquée au-dessus du dendrogramme Identification du patient Pt ID, site de l’échantillon Source, et nombre de jours après l’admission à l’unité de soins intensifs que la souche a été isolée Jour sont fournis Escherichia la souche coli K-12 a été utilisée comme souche de référence Pour les conditions de fonctionnement, voir Patients, matériaux et méthodes BAL, lavage broncho-alvéolaire; SG, plaque dentaire supragingivale; TS, sécrétion trachéaleFigures 3Voir grandTélécharger diapositivesModèles PFT avec dendrogramme pour les isolats d’Escherichia coli Une échelle d’indice de similarité génétique est indiquée au-dessus du dendrogramme Identification du patient Pt ID, site d’échantillonnage Source et nombre de jours après l’admission à l’unité de soins intensifs sont fournis Escherichia coli K-12 souche a été utilisée comme souche de référence Pour les conditions de fonctionnement, voir Patients, matériaux, et méthodes BAL, lavage broncho-alvéolaire; SG, plaque dentaire supragingivale; TS, sécrétion trachéale

Figure 4View largeTélécharger des diagrammes de DFGP avec dendrogramme pour d’autres bacilles gram-négatifs potentiellement pathogènes Identification du patient Pt ID, site d’échantillonnage Source, nombre de jours après l’admission à l’unité de soins intensifs où la souche a été isolée Jour sont fournis λ L’ADN a été utilisé comme référence normalisation Pour les conditions de fonctionnement, voir Patients, matériaux et méthodes BAL, lavage broncho-alvéolaire; SG, plaque dentaire supragingivale; TS, sécrétion trachéaleFigure 4Vue plus largeTéléchargement de profilsPDF avec dendrogramme pour d’autres bacilles Gram négatif potentiellement pathogènes Identification du patient Pt ID, site d’échantillonnage Source, nombre de jours après l’admission à l’unité de soins intensifs où la souche a été isolée la référence pour la normalisation Pour les conditions de fonctionnement, voir Patients, matériaux et méthodes BAL, lavage broncho-alvéolaire; SG, plaque dentaire supragingivale; TS, sécrétion trachéale La parenté des souches isolées de la bouche au départ avec d’autres souches isolées de la bouche, de la trachée et / ou du poumon du même patient après étude de base a été étudiée par électrophorèse des isolats de chaque site prélevés au fil du temps. Patients de colonisation S aureus 84 et 94; figure 1, 1 patient avec un patient de colonisation par P aeruginosa 89; figure 2, et 2 patients avec des patients de colonisation E coli 12 et 41; La figure 3 a été sélectionnée pour l’analyse PFGE Les profils PFGE de souches de la même espèce obtenues du même patient n’ont montré aucune différence dans les profils de la bande au cours du temps ⩾90% indice de similarité En outre, 1 patient avec S De plus, une souche de S aureus isolée de l’embouchure au départ a semblé coloniser plus tard la trachée et le poumon où elle a été isolée aux jours 10, 14 et 20. Des résultats similaires ont été trouvés pour P aeruginosa figure 2 et E coli Figure 3 Les profils de PFGE ont été comparés entre des souches isolées d’individus différents Globalement, les isolats d’un individu donné semblaient être indépendants du clonage par rapport à ceux isolés d’autres patients L’exception était P aeruginosa figure 2; Plusieurs souches de P aeruginosa isolées de patients différents semblaient partager des profils de PFGE identiques. LMST a été réalisée sur des isolats sélectionnés qui étaient indifférenciables par PFGE en tant que témoins positifs ou étroitement apparentés montrant des différences de 2 ou 3 bandes par PFGE En outre, des souches hétérogènes Des différences de 7 bandes ont également été étudiées. Un total de 26 types de séquence MLST ont été obtenus à partir de 12 isolats de S aureus figure 1, 9 isolats de P aeruginosa figure 2, et 5 isolats de données E coli non représentés. ont été trouvés dans des isolats avec des types de PFGE indiscernables isolés de sites différents et isolés à des moments différents des mêmes patients 1 et 2 Inversement, les types de PFGE distinctement non apparentés présentaient toujours des types de séquences différents. aussi discriminatoire que les types PFGE Par exemple, les souches de référence S aureus résistantes à la méthicilline [8] USA100 et USA800, démontrées par PFGE être dans un groupe différent des isolats obtenus des patients 41 et 59, ont également été montrés par MLST partager les mêmes profils alléliques séquence type 5 que les clones des patients 41 et 59mec A et PVL typage de S aureus Seules les souches du patient 59 étaient positives pour mecA, Ce résultat n’est pas surprenant, car les souches de S aureus résistantes à la méthicilline obtenues auprès de personnes souffrant d’infections associées aux soins de santé USA100, USA200, et USA800 était également négatif pour la PVL [33] En outre, aucune des souches cliniques du TICU ne s’est regroupée avec les isolats USA300 PVL-positifs, qui sont connus pour être associés à la maladie associée à la communauté.

Discussion

Dans la présente étude, les isolats de pathogènes respiratoires buccaux étaient la plupart du temps indistinguables génétiquement des isolats trachéaux et BAL du même patient. Ces résultats concordent avec ceux d’études antérieures qui ont montré que la cavité buccale peut servir de réservoir pour les pathogènes respiratoires chez les patients ventilation mécanique [34-38] Ces résultats viennent corroborer un rapport antérieur portant sur 49 patients âgés admis à l’hôpital à partir d’une maison de retraite [39]; Dans ce rapport, le génotypage moléculaire a révélé que 9 des 13 isolats récupérés du liquide de BAL étaient génétiquement appariés à des souches provenant du même patient. En outre, une étude plus récente a examiné l’oropharynx comme réservoir d’espèces respiratoires utilisant l’ADN ribosomique 16S analyse [40] Cette approche moléculaire indépendante de la culture identifiait non seulement des agents pathogènes connus pour être associés à la PAV, comme Pseudomonas species et Enterobacteriaceae, mais aussi diverses espèces encore non cultivées dans la cavité buccale et les spécimens BAL. La pathogenèse de la pneumonie implique l’aspiration des agents pathogènes dans les voies respiratoires inférieures et l’incapacité des défenses de l’hôte à les éliminer [41] Dans la PVA, une surface artificielle, comme une sonde endotrachéale, contourne les barrières anatomiques, comme la glotte et le larynx, entre l’oropharynx et la trachée. le transport des bactéries de la cavité buccale Les résultats rapportés ici soutiennent la bouche comme un portail d’entrée probable pour passage de bactéries dans les poumons [42] Dans la présente étude, la plupart des patients ont été admis à l’hôpital suite à un traumatisme, par exemple un accident de la route ou un traumatisme crânien fermé. La flore et les voies respiratoires inférieures stériles Les résultats de la présente étude démontrent de manière convaincante que les pathogènes ont émergé de la flore buccale résidente ou ont été acquis dans l’environnement après leur admission à l’hôpital. Les organismes se propagent ensuite de la bouche à la trachée. initier l’infection D’autres découvertes récentes ont également mis en évidence de fortes corrélations entre la colonisation oropharyngée et les prélèvements de LBA positifs subséquents [19] Dans la présente étude, le même clone de P aeruginosa était partagé chez 3 des 6 patients figure 2B, alors que les clones uniques provenaient de l’autre 3 patients figure 2A Ceci est cohérent avec les études récentes qui démontrent que l’acquisition croisée responsable d’au moins 50% des infections à P. aeruginosa dans les USI [43-45] Ainsi, P aeruginosa est souvent transmis d’un patient à un autre ou d’une source commune à l’USI Tous les autres pathogènes cibles S aureus et autres bactéries Gram-négatives Les clones étaient-ils uniques à chaque patient? L’hétérogénéité de la plupart des souches récupérées chez des patients en réanimation suggère une origine endogène, ce qui est cohérent avec les résultats d’études antérieures [46] De plus, tous les isolats de S aureus récupérés étaient PVL négatif; ceci est cohérent avec l’absence dans l’USI des souches isotype USA300 et de type 8, qui sont des caractéristiques couramment observées dans les isolats S aureus méthicillinorésistants associés à la communauté. En conclusion, nos résultats montrent que, chez les patients ayant subi une ventilation mécanique, hôpital de la communauté, les pathogènes respiratoires du poumon sont souvent génétiquement indiscernables des souches isolées de la cavité buccale; ceci fournit des preuves convaincantes que la plaque dentaire sert de réservoir important pour les pathogènes respiratoires chez ces patients. Plusieurs essais contrôlés randomisés ont suggéré que les interventions visant à améliorer l’hygiène buccale chez les patients recevant une ventilation mécanique réduisent le risque de PAV [47-49] interventions optimales pour réduire la colonisation de la bouche par les pathogènes respiratoires et ainsi réduire le risque de pneumonie chez les patients hospitalisés en USI

Remerciements

Nous remercions le Dr Daniel Amsterdam du département de médecine de laboratoire du centre médical du centre médical du comté d’Erie Buffalo, NY, et son équipe, pour l’isolement et l’identification des souches bactériennes cibles; Dr Timothy F Murphy de la Division des maladies infectieuses du Veterans Affairs Western New York, système de soins de santé Buffalo, NY, et ses collaborateurs, Nina Johnson et Aimee L Brauer, pour avoir fourni un excellent soutien technique et discuté de l’ECP; étudient les infirmières Angela Vacanti et Noreen Frawley, pour l’inscription des patients et la collecte des échantillons; et Ann Gill du Centre d’excellence en bioinformatique et sciences de la vie Buffalo, NY, pour une discussion sur l’analyse MLSTSupport financier Subvention de l’Institut national de recherche dentaire et craniofaciale DE014685Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: aucun conflit